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Hela-EGFP对照细胞株

 

 

货号:CG002

Hela-EGFP细胞株是用表达EGFP的慢病毒感染Hela细胞,经嘌呤霉素筛选得到的多克隆细胞株。细胞稳定表达EGFP荧光蛋白,培养时无需抗生素维持。可作为慢病毒感染实验中的对照细胞株使用。

293 EGFP稳转细胞株

 

 

细胞特性:

细胞来源:Hela(人子宫颈癌细胞)

细胞类型:EGFP稳定过表达多克隆细胞株

表达蛋白:EGFP

构建载体:pLV-EGFP-C(VL3215)

筛选抗生素:嘌呤霉素

培养基:DMEM高糖培养基+10%FBS

 

 

构建方法:

慢病毒载体pLV-EGFP-C包装为慢病毒,转染Hela细胞,经嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP荧光蛋白的多克隆细胞株。

 

 

细胞培养方法:

以25cm培养瓶传代为例。

1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。

2、吸去细胞培养液。

3、用PBS漂洗1到2次。

4、加入3ml胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别,消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可。

5、加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。

6、按1:3到1:5接种细胞。

 

 

 


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