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293-CRE-Luci细胞株(CS003)

 

 

产品说明:

cAMP反应原件(cAMP Response Elements, CRE)是转录因子CRE结合蛋白(CREB)识别的DNA调控原件。CRE信号通路参与细胞增殖、心率调控等多种生物功能。

CRE-RE-Luci稳转细胞株采用293V细胞株构建,通过慢病毒稳定转入CRE控制表达的luciferase基因。CRE激活启动luciferase表达,通过检测luciferase活性可以灵敏地反应CRE通路的状态。

 

产品资料:

品名:CRE-Luci细胞株(293)

货号:CS003
原始细胞株:HEK293V(HEK293T亚克隆)
所用载体:pLV-CRE-Luci(VL4102)
构建方法:慢病毒转染构建 单克隆筛选
抗性:puromycin
克隆属性:单克隆细胞株

 

细胞形态:

 

产品包装及发货:

1×10^6/支,2支。冻存细胞,干冰发货。货期1~2周。

 

培养方法:

DMEM高糖培养基+10%FBS,5% CO2,37℃培养。3天左右传代1次,1:3~1:5传代。

 

构建方法:

将慢病毒载体pLV-CRE-Luci包装为慢病毒,转染293V细胞,用嘌呤霉素进行初步筛选。将筛选后的细胞进行单克隆细胞培养,检测克隆株的luciferase本底表达及对CRE信号通路激活的反应性。最后得到能灵敏反应CRE激活的克隆株。

 

细胞质量检测:

1、细胞形态正常,贴壁生长。增殖良好。

2、cAMP激动剂forskolin刺激,luciferase活性明显增高。

 

功能实验结果:

CRE-Luci细胞株功能检测实验结果。细胞用forskolin 5uM刺激6小时,收集细胞裂解后加入萤火虫荧光素酶反应底物,化学发光成像仪成像。

 

说明书下载:

CRE-Luci-293manual.pdf

 

 


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