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293-NFAT-RE-Luci细胞株(CS001 )

 

 

产品说明:

NFAT(Nuclear Factor of Activated T cells)转录因子家族在免疫反应中对多种细胞因子的表达有重要作用,也参与了肿瘤免疫、心肌功能调控、凋亡等多种功能。包括钙调蛋白和蛋白激酶C在内的多种信号通路都可以通过NFAT发挥作用。

NFAT-RE-Luci稳转细胞株采用293V细胞株构建,通过慢病毒稳定转入NFAT控制表达的luciferase基因。NFAT激活启动luciferase表达,通过检测luciferase活性可以灵敏地反应NFAT通路的状态。

 

产品资料:

品名:NFAT-RE-Luci细胞株(293)

货号:CS001
原始细胞株:HEK293V(HEK293T亚克隆)
所用载体:pLV-NFAT-ER-Luci
构建方法:慢病毒转染构建 单克隆筛选
抗性:puromycin
克隆属性:单克隆细胞株

 

细胞形态:

 

产品包装及发货:

1×10^6/支,2支。冻存细胞,干冰发货。货期1~2周。

 

培养方法:

DMEM高糖培养基+10%FBS,5% CO2,37℃培养。3天左右传代1次,1:3~1:5传代。

 

构建方法:

将慢病毒载体pLV-NFAT-RE-Luci包装为慢病毒,转染293V细胞,用嘌呤霉素进行初步筛选。将筛选后的细胞进行单克隆细胞培养,检测克隆株的luciferase本底表达及对NFAT信号通路激活的反应性。最后得到能灵敏反应NFAT激活的克隆株。

 

细胞质量检测:

1、细胞形态正常,贴壁生长。增殖良好。

2、PMA+Ionomycin刺激NFAT信号通路,luciferase活性增高显著。

 

PMA+Ionomycin刺激实验结果:

NFAT activity assay

NFAT-RE-Luci稳转细胞株功能检测实验结果。细胞用PMA 5ng/ml+Ionomycin 1uM刺激6小时,收集细胞裂解后加入萤火虫荧光素酶反应底物,用化学发光成像仪成像。

 

说明书下载:

NFAT-RE-Luci稳转细胞株-293.pdf

 

 


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