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Trizol(总 RNA 提取试剂)（X2372）

Trizol(总 RNA 提取试剂)用于从组织和细胞中分离总 RNA。其适用范围广，操作简单快速。利用其提取的总 RNA 完整性好、 纯度高， 最大限度去除 DNA 和蛋白污染，后续可直接用于 RT-PCR、Northern Blot、mRNA 纯化以及体外翻译等实验。

保存：2-8℃避光密封保存 12 个月。

使用说明
需自备氯仿，异丙醇或无水乙醇，75%乙醇(RNase-free H₂O 配制)和 RNase-free H₂O。

1、样本裂解
组织样本：
（1）将 50-100 mg 动物或植物组织切成小块，放入普通玻璃匀浆器内，加入 1 ml  Trizol，匀浆。
注：裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。对于富含蛋白、脂肪或多糖物质的组织样品如肌肉、脂肪组织和植物结节部位等，匀浆后仍存留有不溶物质，应先 4℃ 12,000xg 离心 10 min，取上清至新的离心管中。

细胞样本：
（1）贴壁细胞：去除培养液，每 10 cm 2 培养面积（6 孔板单孔或 35 mm 平皿）加入 1 ml Trizol，用加样器吹打数次，以确保细胞完全裂解，然后转移至离心管中。

注：Trizol 的使用量应由培养皿表面积决定，而非由细胞数目决定。Trizol 量不足可能导致提取的 RNA 中有 DNA 污染。

（2）悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，每 5-10 x 10 6 动植物或酵母细胞，或每 1 x 10 7 细菌细胞加入 1mlTrizol， 用加样器吹打，使其完全裂解，然后转移至离心管中。

2、1ml Trizol 裂解产物于室温放置 5 min。（此时样品可在-80℃长期保存）
3、每 1 ml Trizol 加入 200ul 氯仿，剧烈振荡 15 s，室温放置 2-3 min。
4、4℃ 12,000 xg 离心 15 min，样品分成三层：红色的下层有机相，中间层和无色的上层水相。
5、吸取含总 RNA 的上层水相（约 500ul）至一新的离心管中，注意不要碰到中间层或下层有机相。
6、加入吸取水相等体积的异丙醇或双倍体积的无水乙醇，颠倒混匀。
7、4℃ 12,000 xg 离心 10 min，弃除上清。
8、加入 1 ml 75%乙醇，颠倒混匀，4℃ 12,000 xg 离心 5 min，弃除上清。
9、4℃ 12,000 xg 空离 2 min，吸去残留液体。
10、室温放置 5-10 min 晾干，加入适量 RNase-free H 2 O 溶解 RNA。

注意事项
1、本产品含有苯酚等物质，实验时请穿戴实验服并一次性手套和口罩。
2、所有离心管，枪头及相关溶液都必须无 RNA 酶污染。
3、本产品仅作科研实验使用，不支持临床等研究。