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Polyfect-C转染试剂

产品简介：
Polyfect-C转染试剂是新一代纳米转染试剂，适合用于多数贴壁动物细胞系，悬浮动物细胞系以及多数原代细胞。具有细胞毒性低，操作简便，血清和抗生素对转染无影响，质粒和转染试剂用量少等显著优点。该转染试剂操作简便，孵育时间短，转染效果可靠。

规格：

保存：
本品在4℃可保存3个月，如需长期保存可在-20℃冻存。
冻融后缓慢吹吸混匀，切勿剧烈震荡。

转染前注意事项：

1. 转染密度以80%-95%比较合适。
2. 如果长时间未使用转染试剂，使用前需吹吸混匀转染试剂。
3. 转染复合物形成后血清和抗生素对转染无影响，但形成转染复合物过程中不能有血清和抗生素。
4. 不同细胞培养装置的转染试剂和质粒用量见下表。表中的用量根据HEK293V细胞优化。如果用Polyfect-C转染其他细胞，也可以参照表中的量进行。

操作步骤：

下面以10cm平皿为例说明转染步骤。

1. 转染前24小时，将293V细胞以4-5×106/10cm平皿密度接种，加入10ml培养基37℃，5% CO2培养。细胞转染前密度应达到90%。
2. 吹吸混匀Polyfect-C转染试剂。
3. 准备2个离心管，按以下顺序分别制备质粒和转染试剂稀释液。

• 充分混匀。
• 将转染试剂稀释液（离心管2）加入质粒DNA溶液（离心管1）中，立刻充分混匀。注意加入顺序非常重要。
• 室温孵育转染混合液5分钟。混合液可以在2小时内保持稳定。
• 将转染混合液逐滴加入步骤1准备的细胞培养皿，前后晃动培养皿，充分混匀。
• 37℃培养。
• 如果需要换液，可在转染后4-6小时进行，不会影响转染效果。
• 继续培养24-48小时进行细胞检测或其他操作。