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重组载体构建服务（W3202）

 

 

服务编号：W3202

采用同源重组法进行哺乳动物细胞基因编辑时，需要重组修复模板。修复模板可以以PCR产物或质粒的形式提供。采用质粒提供的修复模板可以在细胞中存在更长时间，提高修复成功率。




我们的修复载体pHR-sfGFP-Puro载体含GFP和puromycin抗性基因双重筛选标签，可以很方便地用流式细胞仪或者抗生素筛选出阳性细胞。载体中有两个LoxP位点。当基因敲除成功细胞筛选出来后，转入CRE表达载体可以将筛选标签清除。




pHR-sfGFP-Puro载体与SL无缝克隆技术结合，可以一次克隆完成5’端和3’端重组臂的组装。稍加设计，甚至可以同时完成敲入基因的组装。

一般重组载体构建从PCR扩增重组臂到两次克隆，实验周期至少需要3-4周。如果需要基因合成，实验周期则长达一个月以上。 通过我们的克隆技术，两个重组臂克隆仅需1周时间，即使加上基因合成，全部实验时间也仅需3周。



 

服务优点

• 一次克隆完成两个重组臂构建

• 与基因合成服务无缝衔接

• 重组载体设计到构建全程服务

• 设计灵活，可同时构建敲入基因

• 与Cas9哺乳动物细胞重组编辑系统结合，实现高效基因编辑

 

工作原理



 

相关服务及产品

服务编号	服务名称
W3203	sgRNA表达载体组装服务
W1001	基因合成服务
W3201	哺乳动物细胞基因编辑服务
CR2002	SL重组载体构建试剂盒
CR2102	哺乳动物细胞Cas9基因编辑试剂盒

 

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