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信号通路研究工具细胞株
信号通路研究工具细胞株是将特定信号通路响应元件控制下的报告基因稳定整合入宿主细胞基因组构建的细胞株：通路激活时报告基因随之表达，荧光强度或荧光素酶活性直接反映通路的活化水平，可用于靶点药物筛选（激动剂/抑制剂）、信号通路活性检测与机制研究。
细胞种类与通路覆盖
现有细胞株以 HEK293 为宿主（另有 A549 来源的 CS026），覆盖两类信号通路：
转录因子响应元件类：NFAT、CRE（cAMP）、NF-κB、ERE（雌激素）、SRE（血清反应元件）；
受体偶联类：CHRM3（乙酰胆碱受体）/ DRD1（多巴胺受体）偶联 SRE 或 CRE，用于 GPCR 信号研究。
构建方法与技术升级
现有细胞株分两代构建技术，2022 年起全部改用转座子系统构建，是本系列的核心技术升级：
| 对比项 | 早期株：慢病毒系统 | 现有主力：转座子系统 |
| 对应产品 | CS002 / CS004 / CS005 / CS007 | CS025–CS033（9 株） |
| 本底表达 | 较高 | 显著更低 |
| 刺激后反应倍数 | 较低 | 显著更高（见下方实例曲线，约 440 倍诱导） |
| 提供形式 | 单克隆为主（CS007 为多克隆） | 多数以单克隆提供 |
全部细胞株经抗生素初筛、克隆筛选、功能验证三步获得，传代稳定；转座子代新批次均附药物刺激曲线定量数据。
图1、报告基因表达框结构示意（以早期慢病毒构建为例）
报告基因系统怎么选
EGFP 荧光直读型（CS002、CS004）：优点是荧光显微镜下直接观察，不需要检测试剂，细胞保持活性状态，可对活细胞连续观察记录；缺点是对刺激信号反应不灵敏，响应范围显著低于 luciferase 报告基因，适合定性观察。
FLuci 定量型：加入底物后经酶标仪/发光仪定量读数，灵敏度高、动态范围大，适合药物刺激定量与高通量筛选。
FLuci + Rluci 双报告型（CS025、CS026）：共表达海肾荧光素酶内参，对细胞数与操作差异归一化，适合严格定量比较。
实例
转座子代细胞株的典型定量数据（摘自 CS027 NFAT-RE-Luci）：PMA/Ionomycin 23 个倍比稀释浓度刺激 6 小时，萤火虫荧光素酶检测，最大诱导约 440 倍，剂量-效应关系清晰。
图2、NFAT-RE-Luci（CS027）药物刺激曲线
相关产品：信号通路研究慢病毒载体
| 货号 | 产品名称 | 报告基因 | 信号通路 |
|---|---|---|---|
| CS002 | NFAT-RE-EGFP稳转细胞株（293） | EGFP | NFAT |
| CS004 | CRE-EGFP细胞株（293） | EGFP | CRE（cAMP） |
| CS005 | NFKB-RE-Luci细胞株（293） | FLuci | NF-κB |
| CS007 | ERE-Luci细胞株（293） | FLuci | ERE（雌激素） |
| CS025 | NFKB-RE-Luci（Rluci）细胞株（293） | FLuci（Rluci内参） | NF-κB |
| CS026 | NFKB-RE-Luci（Rluci）细胞株（549） | FLuci（Rluci内参） | NF-κB |
| CS027 | NFAT-RE-Luci细胞株（293） | FLuci | NFAT |
| CS028 | Cre-RE-Luc细胞株（293） | FLuci | CRE（cAMP） |
| CS029 | SRE-Luci细胞株（293） | FLuci | SRE（Serum Response Element） |
| CS030 | NFKB-RE-Luci 细胞株（293） | FLuci | NF-κB |
| CS031 | CHRM3- SRE-Luci细胞株（293） | FLuci | CHRM3/SRE |
| CS032 | DRD1-CRE-Luci细胞株（293） | FLuci | DRD1/CRE |
| CS033 | CHRM3- CRE-Luci细胞株（293） | FLuci | CHRM3/CRE |
渝公网安备50010502504053
