
品名:NFAT-RE-EGFP稳转细胞株(293)
货号:CS002
规格:
细胞来源:HEK293V(HEK293T亚克隆)
表达基因:EGFP
构建载体:pLV-NFAT-ER-EGFP
构建方法:慢病毒转染构建 单克隆筛选
克隆属性:单克隆细胞株
抗性:puromycin
简介:NFAT(Nuclear Factor of Activated T cells)转录因子家族在免疫反应中对多种细胞因子的表达有重要作用,也参与了肿瘤免疫、心肌功能调控、凋亡等多种功能。包括钙调蛋白和蛋白激酶C在内的多种信号通路都可以通过NFAT发挥作用。NFAT-RE-EGFP稳转细胞株采用293V细胞株构建,通过慢病毒稳定转入NFAT控制表达的EGFP基因。NFAT激活启动EGFP表达,通过检测EGFP荧光可以灵敏地反应NFAT通路的状态。
产品资料:
细胞形态:

产品包装及发货:
1 x 10^6/支,2支。冻存细胞,干冰发货。货期1~2周。
培养方法:
DMEM ( g i b c o 货号: 1 2 1 0 0 - 0 6 1 )高糖培养基+10%FBS,5% CO2,37℃培养。3天左右传代1次,1:3~1:5传代。
将慢病毒载体pLV-NFAT-RE-EGFP包装为慢病毒,转染293V细胞,用嘌呤霉素进行初步筛选。将筛选后的细胞进行单克隆细胞培养,检测克隆株的EGFP本底表达及对NFAT信号通路激活的反应性。最后得到能灵敏反应NFAT激活的克隆株。
细胞质量检测:
1、细胞形态正常,贴壁生长。增殖良好。
2、PMA+Ionomycin刺激NFAT信号通路,EGFP荧光表达明显增高。
PMA+Ionomycin刺激实验结果:

NFAT-RE-EGFP稳转细胞株功能检测实验结果。细胞用PMA 5ng/ml+Ionomycin 1uM刺激24小时,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达。
说明书下载:
NFAT-RE-EGFP-293manual.pdf