优惠信息
大肠杆菌基因编辑
病毒表达
CRISPR/Cas9
稳转细胞株筛选
载体构建服务
lncRNA
技术中心
关于我们
产品
品名：NFKB-RE-Luci（Rluci）细胞株（549）
货号：CS026
规格：
细胞来源：A549
表达基因：FLuci（Rluci内参）
构建载体：
构建方法：转座子
克隆属性：多克隆细胞株
抗性：hygromycin
简介：NFKB-RE-Luci（Rluci）细胞株（A549）表达NFkappaB反应元件控制的萤火虫荧光素酶和作为内参的海肾荧光素酶。细胞采用人肺癌细胞A549构建，采用hygromycin抗生素筛选得到的稳定细胞株。该细胞株可以通过Luciferase反应NFKB信号通路的活性。
产品资料：
培养基：MEM (含NEAA)（gibco 货号：41500083）培养基+10%FBS，hygromycin 50ug/ml
产品包装：
1 X 10^6 细胞/支，1支。干冰运输。
产品验收注意 事项：
1.细胞收到时应该是冻存状态，并且有干冰保护。如果收到货时细胞已融化，请立即联 系我们。
2.我们建议您收到产品后立刻储存于液氮，或者对细胞进行复苏，扩增培养并大量冻 存。不可保存于-20℃或者-80℃冰箱。
3.由于运输影响，细胞复苏后1到3代可能出现形态异常，生长缓慢等情况。请传代培养2-3代，待细胞恢复正常再进行实验。
细胞形态：
培养方法：
细胞培养：
培养基：MEM培养基+10%FBS，hygromycin 1ug/ml。可根据培养习惯加入双抗。
漂洗液：PBS
消化液：0.25%胰蛋白酶+0.5mM EDTA，溶解于PBS
冻存液：MEM培养基+40%FBS+10%DMSO
初始培养（细胞复苏及培养）：
收到细胞请立即复苏。初步检查无污染、细胞存活后请扩大培养，冻存足量细胞以备以后实验使用。
准备37℃恒温水浴，细胞培养基，60mm细胞培养皿或者25cm培养瓶。
将细胞冻存管放入37℃水浴中快速融化，期间不断晃动冻存管加速溶解。
2500rpm 室温离心5min。
用70%乙醇清洁冻存管外壁。在超净工作台中弃去上清液。
用1ml培养基轻轻吹吸重悬细胞沉淀。接种到已准备细胞培养皿，补足培养5ml。
37℃，5% CO2培养24h，观察细胞贴壁情况。
48h后根据细胞密度换液或传代。
以后每2-3天传代一次。当细胞达到5 X 10^6个（约1个10cm培养皿的量），准备冻存部分细胞。剩余细胞用于实验。
细胞冻存：
消化生长良好的细胞，用细胞培养基重悬，细胞密度为1 X 10^6 /ml左右。
加入等体积的2 X 冻存液（80%FBS+20%DMSO）。轻轻吹吸混匀。
分装到冻存管中，放入程序降温盒过夜。
将细胞转移到液氮罐中。
功能试验：
1.TNFa刺激实验
试剂： | TNFa（sigma，H8916），双荧光素酶检测试剂盒（碧云天，RG088S）
|
细胞刺激： |
|
实验结果 |
|
2.TNFa刺激抑制实验
试剂： | TNFa（sigma，H8916），双荧光素酶检测试剂盒（碧云天，RG088S），地塞米松（sigma，D1756）
|
细胞刺激： | 消化收集生长良好的细胞，均匀铺至96孔板，培养24小时。
|
实验结果： |
|
渝公网安备50010502504053
