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T24稳定表达Luciferase（萤火虫荧光素酶）及mKate2荧光蛋白细胞株(CL005)

细胞株类型：稳定表达Luciferase（萤火虫荧光素酶）及mKate2荧光蛋白单克隆细胞株

培养基：MEM(含NEAA)(gibco 货号：41500083)培养基+10%FBS

消化液：0.25%胰蛋白酶，0.53mM EDTA

冻存液：50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO

培养条件：37℃，5% CO2

细胞株构建方法：

慢病毒载体pLV-mKate2-luci(CMV)（货号V3513）包装慢病毒后感染T24细胞，用嘌呤霉素筛选得到多克隆细胞株。然后通过单克隆分选鉴定得到的高表达单克隆细胞株。

细胞荧光图片：

Luciferase活性检测：

收到细胞的处理：
根据客户所在地及发货季节，我们可能采用干冰运输的冻存细胞或者常温运输的培养瓶细胞两种不同形式发货。收到细胞后根据细胞运输类型采用下面两种方式操作。

干冰运输细胞：

1. 37℃水浴融化细胞冻存液，间或摇动冻存管以加速融化过程。待细胞冻存液完全融化后，用70%乙醇消毒细胞冻存管外壁。

2. 室温 2500rpm离心5分钟收集细胞。吸去上清。

3. 用1ml培养基重悬细胞。

4. 将细胞接种到6mm培养皿或25cm培养瓶中，补加5ml培养基，37℃ 5%CO₂培养。

 

常温运输细胞：

1.  2500rpm 10min室温离心收集细胞。

2. 用细胞培养基轻柔吹吸重悬细胞。

3. 接种到25cm培养瓶或60mm培养皿，补足培养基到5ml。

4. 放到细胞培养箱，37℃ 5%CO₂培养过夜。

5. 第二天观察细胞贴壁情况，换液去除未贴壁细胞，继续培养。

6. 细胞生长后及时消化传代，尽早冻存1~2支。

说明书下载:

CL005细胞株