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产品概述
SUMO 蛋白酶(SUMO Protease)又称 ULP 蛋白酶,是一种高活性的半胱氨酸蛋白酶,识别完整的SUMO蛋白序列,并依赖于正确的蛋白构象,因此酶切反应具有很高的特异性。本品由大肠杆菌重组表达生产,无其他杂酶污染,在较宽的温度范围(4 - 30℃)、离子强度范围(0 - 300 mM NaCl)和 pH 范围(6 - 9)内都有较高的活性。本品含有 his 标签,便于使用Ni亲和层析吸附去除。
保存条件:
长期储存于-80℃,可保存2年; 或小量分装后保存于-20℃,可保存12个月,避免反复冻融。
规格:
货号 | 浓度 | 规格 |
P2034-200 | 10U/ul | 20ul |
P2034-1000 | 10U/ul | 100ul |
P2034-5000 | 10U/ul | 500ul |
产品内容:
组分 | 详细组成 | 规格 | ||
200U | 1000U | 5000U | ||
SUMO 蛋白酶(10U/ul) | 25 mM Tris-Cl, pH 8.0 250 mM NaCl 0.5 mM DTT 50% (v/v) glycerol | 20 ul | 100 ul | 500ul |
10X SUMO Protease Buffer(含盐) | 500 mM Tris-Cl pH 8.0 1500 mM NaCl 10 mM DTT | 400 ul | 2x1 ml | 10x1 ml |
10X SUMO Protease Buffer(不含盐) | 500 mM Tris-Cl pH 8.0 10 mM DTT | 400 ul | 2x1 ml | 10x1 ml |
实验步骤:
1、SUMO Protease切割反应:
由于不同目的蛋白具有不同的特性,所以在实际使用时,建议对酶和目的蛋白的比例进行适当优化,以下是一个简单的针对大部分类型的重组融合蛋白进行酶反应的实验方案。
反应体系如下:
Sumo3融合蛋白 | 15 ug |
SUMO Protease | 1 ul |
10×SUMO Protease buffer | 1.5 ul |
ddH2O | 至15 ul |
4℃反应16小时。
2、SUMO Protease 活性测试SDS-PAGE电泳图:
注意事项
1.为获得最好的酶切效果,重组蛋白须为纯化后的蛋白。
2. 对于大部分融合蛋白,SUMO Protcase 反应体系中 NaC1的浓度为 150mM。但可根据实际情况可在 0-300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的酶切效果。
3、酶切反应中咪唑的终浓度不应高于150mM,否则可能会影响 SUMO Protease 的酶切效。
4、本产品仅限科研用途使用。