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产品说明:
本产品是由酚:氯仿:异戊醇按25:24:1的体积比混合而成,主要用于DNA的提取实验。其原理是利用酚使蛋白质变性,DNA易溶于水,溶于有机溶剂。当有机溶液存在时,蛋白质变性沉淀,离心后有机溶剂在试管底层(有机相),DNA存在于上层水相中,蛋白质则沉淀于两相之间。酚氯仿抽提的作用是去除未消化的蛋白质;氯仿的作用是促进水相与有机相分离和去除DNA溶液中的酚。抽提后用无水乙醇或异丙醇沉淀回收DNA,并用75%乙醇洗去DNA沉淀中的盐,真空干燥,用TE缓冲液溶解DNA即可。
保存:2-8℃避光密封保存12个月。
使用说明:
需自备3M NaAc(pH 5.2),异丙醇或无水乙醇,75%乙醇。
1、DNA粗提物(细胞裂解液、质粒粗提物以及PCR产物等)加去离子水至总体积100ul。
2、加入100ul(等体积)酚氯仿异戊醇试剂,充分振荡混匀。
3、12,000 rpm 离心10 min,样品分成。
4、小心吸取上清至新的离心管中,向上清中加入1/10体积的3M NaAc(pH 5.2),混匀后加入2倍体积的无水乙醇或等体积异丙醇,颠倒混匀。
5、12,000 rpm 离心15 min,弃除上清。
6、加入 1 ml 75%乙醇,颠倒混匀,12,000 rpm 离心 5 min,弃除上清。
7、12,000 rpm 空离 2 min,吸去残留液体。
8、室温放置 5-10 min 晾干,加入适量去离子水或TE溶解。
注意事项:
1、本产品有较强腐蚀性,实验时请穿戴实验服并一次性手套和口罩。
2、本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究。