一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染病毒时细胞密度在80%左右。 2、取出...

style type=text/css !-- .STYLE1 { color: #FF0000; font-weight: bold; } .STYLE2 {color: #FF0000} -- /style pstrong货号：/strongstrongC1203/strongbr strong培养基：/strongDMEM高糖培养基+10%胎牛血清 br strong消化液：/strong0.25%胰蛋白酶，0.53m...

Quantification of long non-coding RNAs using qRT-PCR: comparison of different cDNA synthesis methods and RNA stability - PMC长非编码RNA(lncRNA)是一类调控RNA分子，长度超过200个核苷酸，可用作新的潜在生物标志物，但其检测方法如qRT-PCR仍未得到验证，RNA降解对lnc RNA定量的影响尚不清楚。在这项研究中，测试了...

乙型肝炎病毒(HBV)基因型C与不良预后密切相关，是中国和世界范围内慢性乙型肝炎(CHB)相关肝病的主要原因。然而，对HBV基因型C的机制研究仍然很有限，部分是因为长期缺乏基于基因型C HBV的稳定细胞工具。根据对中国主要流行的C2 HBV亚型的生物信息学分析，我们选择17.3株作为代表性分离物。使用Tet-off基因表达系统，在携带持...

Tomás, H.A., Rodrigues, A.F., Carrondo, M.J.T.et al.LentiPro26: novel stable cell lines for constitutive lentiviral vector production.Sci Rep8, 5271 (2018). https://doi.org/10.1038/s41598-018-23593-y慢病毒载体是促进基因转移和稳定基因表达的良好工具。它们的潜力已经在基因疗法治...

分离自萤火虫萤火虫(Ppy)的荧光素酶催化两步反应，导致d-荧光素的氧化，伴随着峰值在560 nm的黄色-绿色光的发射。在许多应用中，Ppy荧光素酶已被广泛用作活细胞和生物体中的报告基因。然而，荧光素酶的低稳定性和有限的细胞内荧光素浓度限制了一些生物应用。为了应对这些挑战，对Ppy荧光素酶进行蛋白质工程改造的努力已经产...

摘要慢病毒载体是促进基因转移和稳定基因表达的良好工具。它们的潜力已经在基因疗法治疗各种疾病的临床试验中得到证明。对于大规模的LV生产，稳定的生产者系统是理想的，因为它允许可扩展的和成本有效的病毒生产，具有增加的可重复性和安全性。然而，稳定系统的开发具有挑战性且耗时，主要限制在于选择呈现高表达水平Gag-Pr...

一、什么是HEK293HEK293细胞，又叫人胚胎肾细胞293，是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系，具有转染效率高，易于培养等特点。因此成为了广大研究者研究基因功能的一个强大工具。二、HEK293细胞系概览（注：以下细胞介绍中，HEK293细胞简称为...

英茂盛业的慢病毒circRNA表达载体，可以大幅稳定提高circRNA表达量，精确表达指定circRNA。环化效率极高。特别适合circRNA的功能研究。...

英茂盛业的慢病毒circRNA表达载体，可以大幅稳定提高circRNA表达量，精确表达指定circRNA。环化效率极高。特别适合circRNA的功能研究。...

一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒（ 制备方法见Cas9慢病毒包装实验 ）。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染...

原理 分析转化的功能和表达需要 DNA 稳定转染至宿主细胞染色体。外源基因进入细胞后，部分能够通过细胞质进入细胞核内，根据细胞类型，至多 80 ％的进入核内的外源 DNA 得到瞬时表达。极少数情况下，进入细胞的外源 DNA 通过系列非同源性分子间重组核连接，...

骨髓间充质干细胞作为种子细胞存组织工程等领域应用广泛,建立稳定的分离培养体系和统一鉴定标准尤为重要.目的:以不同方法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,并进行细胞形态学观察、表面标志物鉴定及多向分化能力检测.设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于...

稳定细胞系构建 服务内容 1、基于TALEN技术的靶向基因敲除细胞系构建 2、基于TALEN技术的靶向基因敲入细胞系 3、基于慢病毒的稳转过表达细胞系构建 4、基于慢病毒的稳定沉默抑制细胞系构建 基本原理： 基于TALEN技术，利用TALEN靶向基因酶切的原理，将靶向基...

在使用G418、潮霉素B或嘌呤霉素筛选稳定细胞系细胞之前，需要先通过梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度。对于一些常见的细胞系，通常可以在资料中找到推荐的药物浓度。例如Hela细胞用400 g/ml的G41或1 g/ml的嘌呤霉素进行稳定细胞株筛...