一、单克隆细胞系和多克隆细胞系概念 多克隆细胞系是基因转染后直接用抗药筛选得到的。筛选出的细胞都表达抗性基因和目的基因。但是包含了各种不同的细胞克...

标签： 发布时间：2015-03-17 1 、花费时间和经费构建稳定细胞株有必要吗？ 答：如果您需要对过表达或者表达降低目的基因的细胞进行反复试验，那么构建稳定细胞株是有必要的。 第一，可以减少不同批次实验中转染效率差异带来的实验结果差异，提高实验的可重...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒（ 制备方法见Cas9慢病毒包装实验 ）。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染...

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原理 分析转化的功能和表达需要 DNA 稳定转染至宿主细胞染色体。外源基因进入细胞后，部分能够通过细胞质进入细胞核内，根据细胞类型，至多 80 ％的进入核内的外源 DNA 得到瞬时表达。极少数情况下，进入细胞的外源 DNA 通过系列非同源性分子间重组核连接，...

【据日本《产经新闻》8月2报道，日本京都大学iPS细胞研究所江藤浩之教授(干细胞生物学)带领的研究团队8月1日发表声明称，使用源于血液病患者体内的人工诱导多功能干细胞(iPS细胞)进行实验时，发现了红血球合成的部分过程。该结果刊登在了美国科学杂志《临床...

细胞外基质不只具有连接、支持、保水、抗压及保护等物理学作用，而且对细胞的基本生命活动发挥全方位的生物学作用。 1．影响细胞的存活、生长与死亡 正常真核细胞，除成熟血细胞外，大多须粘附于特定的细胞外基质上才能抑制凋亡而存活，称为定着依赖性（anch...

一、生化方法 1、磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 （1）转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1105至4105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%～7% CO2的37℃温箱孵育20～24 h。转染前1 h换液。 （2）按照下属方法...

科技日报讯 （记者刘霞）据英国《每日电讯报》7月16日（北京时间）报道，美国科学家使用人体诱导多能干细胞（iPS细胞）制造出了能在实验鼠体内存活280天的 人造血管 。发表在最新一期美国《国家科学院学报》上的这项研究成果有助于开发出新的心脏病和糖尿病...

科技日报讯 活细胞内部是个拥挤的场所，各种蛋白质及其他大分子紧紧挤在一起。据物理学家组织网7月14日报道，最近，美国卡内基梅隆大学一个研究小组利用人造细胞系统，对这些聚集在一起的分子进行了近似研究，发现这种紧密聚集有利于基因表达过程，尤其是在...

核纤层蛋白（Lamin）是中间纤维蛋白家族的重要成员，其多聚体组成的网格状结构核纤层紧贴于核膜内侧。核纤层蛋白具有多种功能，包括抑制基因表达。一直以来，人们难以理解核纤层蛋白突变导致诸如骨骼...

原文标题：印度用老鼠干细胞培育出内耳 中国科技网讯 据物理学家组织网7月10日报道，印度科学家在今天出版的《自然》杂志网络版上撰文表示，他们已经成功地将实验鼠的胚胎干细胞转化成了内耳的关键结构。最新发现有望让科学家们更好地理解内耳的发育过程，并...

7月5日，记者在中科院广州生物医药与健康研究院获悉，该院科学家在克服非小细胞肺癌耐药研究方面获得新突破。相关结果在美国《药物化学杂志》和德国《应用化学》上在线发表。 肺癌是严重威胁人类健康的重大疾病，非小细胞肺癌则占所有类型肺癌的85%以上。目...