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Luciferase稳转细胞株稳定表达萤火虫荧光素酶。萤火虫荧光素酶(luciferase)在底物荧光素、Mg2+离子、氧存在的条件下,发生氧化反应,发出可见光。荧光素酶基因可以有多种基因的启动子启动表达,作为报告基因得到广泛的应用,包括启动子活性研究、转录因子研...
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即日起凡购买 CRISPR/Cas9试剂盒 (货号CR001)或者 CRISPR/Cas9 Nick试剂盒 (货号CR002),免费赠送配套 细胞筛选质粒pEGFP/puro 一支。 试剂盒介绍 一、 CRISPR/Cas9试剂盒 货号CR001 CRISPR/Cas9试剂盒的功能包括:构建针对靶基因的基因敲除载体,对基因...
实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...
一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene(用水配制为6mg/ml,-20℃冻存)。 3.Cas9表达慢病毒( 制备方法见Cas9慢病毒包装实验 )。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染...
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我们根据pTYNE载体的序列设计了pCas9/gRNA1对照阳性质粒pCas9-P,该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCas9-P表达的Cas9蛋白和gRNA组合现对pTYNE载体切割,经细胞修复后,突变的pTYNE将表达出读码框正确的EGFP蛋白,发出明亮的绿色荧光。...
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