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货号:CX002
培养基:MEM(含NEAA))(gibco 货号:41500083)培养基+10%胎牛血清
消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA
冻存液:50%胎牛血清,40%DMEM,10%DMSO
培养条件:37℃,5% CO2
细胞简介
CHO-PDL1细胞是用CHO细胞构建的稳定表达人PDL1基因(CD274,NM_014143全长CDS)的细胞株。细胞采用慢病毒构建,经嘌呤霉素筛选得到。
细胞特性
表达基因:人PDL1基因(CD274,NM_014143全长CDS)
基因导入方法:慢病毒
筛选抗生素:puromycin
细胞克隆:多克隆细胞株
载体图谱 | qPCR检测PDL1表达 |
收到细胞的处理:
根据客户所在地及发货季节,我们可能采用干冰运输的冻存细胞或者常温运输的培养瓶细胞两种不同形式发货。收到细胞后根据细胞运输类型采用下面两种方式操作。
干冰运输细胞:
37℃水浴融化细胞冻存液,间或摇动冻存管以加速融化过程。待细胞冻存液完全融化后,用70%乙醇消毒细胞冻存管外壁。
室温,2500rpm离心5min,吸去冻存液。
在冻存管中加入1ml培养基,轻轻吹吸,重悬细胞。
将细胞接种到25cm培养瓶,补足培养基到5ml,37℃ 5%CO2培养。
常温运输细胞:
在显微镜下观察已收到的细胞,根据细胞状态采取不同方法处理。
如果细胞大部分贴壁且密度不高,则去除细胞原培养基,加入5ml新鲜培养基即可。
如果细胞大部分贴壁且密度较高,则按照常规方法消化细胞,传代分瓶培养。
如果细胞脱落较多,采用下面步骤处理:
a)将原培养基析出装入50ml离心管。200g离心10分钟。
b)去除上清,用5ml培养基重悬细胞,将细胞重悬液接入一新的10cm培养皿培养。
c)在原细胞培养瓶中重新添加5ml培养基进行培养。
d)第二天视细胞密度和状态,换液或传代。
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