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载体类型:慢病毒表达载体
真核细胞筛选抗性:Puromycin
原核抗性:Ampicillin
基因启动子:TRE promoter
过表达基因:luciferase蛋白
使用说明:
1、该载体在TRE启动子控制下表达luciferase蛋白。
2、稳转细胞筛选
该载体为慢病毒载体,与包装载体pH1、pH2(货号KLV3500)配合生产慢病毒,转染目的细胞。然后用嘌呤霉素筛选稳定细胞株。
3、诱导表达
该载体中的目的蛋白表达依赖TetON蛋白调节。配套pLV-TetON-Neo载体可实现luciferase可诱导表达。诱导剂可选Doxycline,诱导浓度50-500ng/ml(根据细胞类型不同有较大区别)。
4、配套材料:
慢病毒包装载体:pH1、pH2(货号KLV3500)
包装细胞:HEK293V(货号C1201)
TetOn调节蛋白表达载体:pLV-TetON-Neo(货号CR3102)或pLV-TetON-Bsd(货号EL6001)
可诱导目的基因表达载体:pLV-TRE -puro(货号EL6010)
筛选抗生素:puromycin
原核抗生素:氨苄青霉素
诱导剂:四环素或者Doxycline