微信扫一扫

下载说明书

在线询价

pLVshRNA-EGFP(2A)Hygro慢病毒RNA干扰载体(VL3107)

Multiple Cloning Site

载体特性：

类型：慢病毒RNA干扰载体

shRNA启动子：Human U6 promoter

荧光标签：EGFP

真核细胞筛选抗性：Hygromycin

原核抗性：Ampicillin

pLVshRNA-EGFP(2A) Hygro载体是基于HIV1的慢病毒RNA干扰载体，用于表达人工设计合成的shRNA，干扰目标基因的表达。RNA干扰序列插入到载体中BamHI和EcoRI之间，由III类RNA聚合酶启动子U6启动子转录产生shRNA，经剪切后产生成熟siRNA，产生干扰效果。

PGK启动子驱动表达EGFP基因和Hygromycin抗性基因。可以使用Hygromycin筛选出稳定过表达目的基因的细胞。EGFP基因有助于判断病毒包装效率以及感染效率，同时也有助于稳定细胞的筛选。

pLVshRNA-EGFP(2A) Hygro载体包含了生产慢病毒所必须的病毒原件以及提高病毒滴度及基因表达效率的原件。载体结构紧凑，具有包装效果稳定，病毒滴度高等优点。

用法说明

pLVshRNA-EGFP(2A) Hygro载体用于在包括原代培养细胞在内的各种哺乳动物细胞中稳定干扰目标基因表达和用Hygromycin筛选基因敲减稳定细胞株。pLVshRNA-EGFP(2A) Hygro载体与包装载体共转染HEK293T细胞后（包装体系货号KLV3501和KLV3502），产生高滴度复制缺陷的慢病毒颗粒，可以直接用于感染细胞或者纯化浓缩后感染细胞。

测序引物：

U6F：GACTATCATATGCTTACCGTAACT

U6R：GGTGGATGTGGAATGTGTG

空载体PCR产物大小：212bp

原核培养特性

pLVshRNA-EGFP(2A)Hygro载体为高拷贝质粒，带有氨苄抗性基因，可以在含有100 μg/ml氨苄抗生素的LB培养基中增殖。宿主菌可以采用DH5α，JM109，TOP10等常见大肠杆菌菌种。