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PEG慢病毒纯化试剂(P1201)


PEG慢病毒纯化试剂是基于PEG沉淀法纯化慢病毒,纯化过程中无需使用高速离心机进行长时间离心,全部纯化时间仅需2小时左右。PEG慢病毒纯化试剂可将病毒液浓度提高10-20倍,病毒回收率在95%以上。PEG慢病毒纯化试剂成分经过优化,在病毒纯化过程中可以保持慢病毒活性。病毒在该试剂中可保持稳定24小时以上。

 

产品特点

 

*  操作简便,仅需2小时即可完成病毒纯化。

*  无需超速离心机等高昂复杂的设备。

*  回收率高,可以回收95%以上的病毒。

*  有效去除病毒液中的杂质,提高病毒转染效率。

 

产品信息

 

货号

规格

价格

P1201

100ml

¥630

P1202250ml¥1260
P1203500ml¥2278

 

 保存:

本品在 4℃可保存 6 个月,-20℃可保存 2 年。

注意:该试剂解冻后需要沉淀溶解并完全混匀后才能使用。


所需试剂、耗材和仪器:

冷冻离心机(50ml 或 15ml 容量);0.45μm 过滤器(推荐使用 Millipore 低蛋白结合滤膜 PES 或 PVDF);无菌PBS 溶液。


操作步骤:

1、 收集病毒上清液,室温 500g 离心 10 分钟,去除细胞碎片,将病毒液转移到一个新的离心管中。

2、 用 0.45μm 过滤器过滤病毒液。

3、 将病毒液转移到新的离心管,保证病毒液体积不超过离心管容积的 2/3。准确计量病毒液体积,每 10ml病毒液加入 PEG 慢病毒纯化试剂 4.7ml。

注意:PEG 慢病毒纯化试剂比较粘稠,需要缓慢吸取,缓慢加入。保持病毒液和纯化试剂体的精确体积比非常重要。


4、 反复颠倒混匀,直到病毒液和纯化试剂完全混合。4℃沉淀 1.5 小时,每 0.5 小时将混合液反复颠倒混匀 1 次。(可将病毒混合液放置在冰水混合物中,或者 4°冰箱进行沉淀)。

5、 沉淀完成后病毒混合液应该变浑浊。4℃,7000g,10min 离心病毒混合液。离心后可见白色沉淀。去除上清。

6、 将离心管倒置在滤纸上,去除残留液体。用原病毒液体积 1/20 的 PBS 重悬沉淀。分装用-80℃冻存。

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注意事项

1、 用 0.45μm 过滤器过滤后的步骤应保持无菌操作。

2、 PEG 慢病毒纯化试剂和病毒液的体积比是高效回收病毒的关键。

3、 PEG 慢病毒纯化试剂可以保持病毒活性稳定。所以病毒沉淀步骤也可以 4℃过夜。但是这样沉淀中的杂蛋白相对较多,因此我们不推荐这样操作。

4、 病毒沉淀时保持低温很重要,推荐用冰水混合物保持温度。

5、 如果病毒包装得比较好,那么沉淀应该全部溶解或者大部分溶解。如果病毒包装时死亡细胞较多,那么病毒沉淀的重悬液中的不溶成分可能较多。这些成分不会影响病毒的感染效率,无需离心去除。



产品说明书下载 

PEG慢病毒纯化试剂说明书.pdf

 

 

 

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