TALEN(Transcription Activator-Like Effector Nuclease) 是一种人工改造的限制性内切酶，是由一个DNA识别域和一个核酸内切酶的切割域(FokⅠ)构成。DNA识别域是由一些非常保守的重复氨基酸序列模块组成，每个模块一般由34个氨基酸（aa）组成，其中第12,13位...

2011年6月，位于美国加利福尼亚州卡尔斯巴德市的生命科技公司(Life Technologies)获得美国伊利诺斯州埃文斯顿市双刀片基金会(Two Blades Foundation)和德国哈雷市马丁-路德大学一组植物学家的独占性许可以便对一种新的基因组编辑技术---转录激活子样效应因子...

Nature Methods杂志是Nature出版社旗下的著名期刊之一，也是方法学领域的权威刊物，主要刊载具有创新性的技术进展，在去年之前，大陆学者在此刊物上发表的技术文章仅有3篇。近期来自北京大学生科院，加州大学洛杉矶分校的研究人员在这一著名期刊上发表了题为...

实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据 pTYNE载体 的序列设计了 pCas9/gRNA1 对照阳性质粒 pCas9-P ，该质粒上的gRNA与pTYNE上EGFP编码区上游结合。pCa...

实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。 pCas9/gRNA3载体 需要成对发挥作用。我们根据 pTYNE载体 设计构建了 pCas9/gRNA3 阳性对照载体 pCAS9-Pf、pCas9-Pr 。由...

实验原理 pTYNE载体 在EGFP编码框上游有2个错码的ATG起始密码子，由于不能有效地启动EGFP表达， pTYNE 转染细胞仅能发出很微弱的荧光。我们根据pTYNE载体上错码的EGFP的上游区域设计并构建了Cas9蛋白基因敲除实验的阳性对照gRNA表达载体pGR-Hygro-P。 pTYNE...

实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染病毒时细胞密度在80%左右。 2、取出...

pCas9/gRNA1 货号：CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除，通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA，实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当，而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...

pCas9/gRNA3载体用于动物细胞基因敲除。该载体表达的Cas9Nickase蛋白是野生Cas9蛋白的D10A突变体。...

pLV-Cas9-Puro 货号： CR2001 载体类型： Cas9 蛋白慢病毒表达载体 原始载体： pLV-Puro 原核抗性：氨苄青霉素 真核抗性：嘌呤霉素 过表达基因： Cas9 蛋白 克隆酶切位点： EcoRI ， BamHI 插入基因大小： 4164bp 使用说明： 1、 用于构建稳定表达 Cas9 蛋白...

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style type=text/css !-- .STYLE1 { color: #FF0000; font-weight: bold; } .STYLE2 {color: #FF0000} -- /style pstrong货号：/strongstrongC1203/strongbr strong培养基：/strongDMEM高糖培养基+10%胎牛血清 br strong消化液：/strong0.25%胰蛋白酶，0.53m...

货号：C1204 培养基：DMEM 高糖培养基+10%胎牛血清 消化液：0.25%胰蛋白酶，0.53mMEDTA 冻存液：50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO 培养条件：37℃，5%CO 2 细胞简介： 293T‐Cas9Nick 细胞是用 HEK293T 细胞构建的稳定表达 Cas9 蛋白的细胞株。在转入 gRNA 表...