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品名:HEK293V-mTomato 细胞 货号:CG017细胞株类型:稳定表达mTomato荧光蛋白多克隆细胞株 细胞来源:HEK293V 细胞(人胚肾细胞) 表达基因:mTomato抗性:puromycin(建议使用浓度1-2ug/ml)培养基:DMEM(gibco 货号:12100-061)高糖培养基+10%FBS消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA 冻存液:50%胎牛血清,40%DMEM,10...
货号:PC1380 sgRNA体外转录试剂盒采用T7 RNA聚合酶复合物高效转录sgRNA。试剂盒中的反应体系根据sgRNA特点进行优化,每个反应可在4小时内获得多达50 g的sgRNA。sgRNA纯化后可用Cas9蛋白体外切割及细胞注射等实验。 试剂盒中配备了合成sgRNA转录模板,sgRNA...
Blasticidin-S简介杀稻瘟菌素S (blasticidin-S)是日本开发的第一个成功的微生物源杀真菌剂[1]。BS是原核生物和真核生物的有效蛋白质合成抑制剂,属于一组氨基酰核苷抗生素。它已被广泛用作苯汞杀真菌剂的替代品来控制由稻瘟病菌(完熟期;稻瘟病菌)。杀稻瘟菌素-S在pH值为5-7的溶液中稳定,在pH值小于4时不稳定,在碱性条件下...
SacB基因是来自枯草芽孢杆菌的糖代谢相关基因,其作用为将蔗糖转变为果聚糖。由于大肠感觉缺乏处理果聚糖的基因,在大肠杆菌中表达SacB基因,会导致SacB基因的产物果聚糖在大肠杆菌中聚集,导致细菌死亡。因此,无需其他条件,仅需在培养基中添加10%蔗糖,就能实现对大肠杆菌的筛选。SacB基因的应用举例如下Crispr Cas9 系统...
本细胞株产品是用两个慢病毒感染后,用抗生素筛选得到的稳定多克隆细胞株。用到的两个慢病毒载体分别为:pLV-dCas9-VP64-Bsd:表达无DNA酶活性的dCas9蛋白与转录激活因子VP64的融合蛋白。该融合蛋白与sgRNA结合后,将定位于细胞基因组DNA的特定位置,并产生转录激活作用。pLV-dCas9-VP64-Bsd慢病毒载体表达Bsd抗性基因,转染细胞后,可以用Blasticidin筛选阳性细胞株。pLV-MPH-Hygro:表达MS2/P65/HSF1融合蛋白。与sgRNA结合并协同产生转录激活作用。pLV-MPH-Hygro慢病毒载体表达Hygromycin抗性基因。CRISPR-SAM采用无DNA切割活性的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白,加上能与MS2蛋白结合的sgRNA2.0,特异性识别并结合含sgRNA靶点的启动子。MS2蛋白连接p65和HSF1转录激活蛋白(MPH融合蛋白)。通过多种转录激活蛋白的协同作用,能更好的摸底细胞内转录激活。Hela-dCas9-VP64-MPH细胞稳定表达dCas9-VP64融合蛋白和MPH融合蛋白。只需要转入配套的sgRNA表达质粒或者人工合成的sgRNA就能实现基因特异性转录激活。...
Multiple Cloning SiteMCS 及其上下游序列:载体特性:类型:慢病毒基因过表达载体基因启动子:EF1α promoter自我剪切肽:T2A真核细胞筛选抗性:Puromycin原核抗性:AmpicillinpLV-EF1a-(T2A)puro载体是基于HIV1的慢病毒基因过表达载体。该载体的克隆位点位于EF1α启动子下游,插入的目的蛋白和Puromycin抗性基...
Multiple Cloning Site载体特性:类型:慢病毒RNA干扰载体shRNA启动子:Human U6 promoter荧光标签:EGFP真核细胞筛选抗性:Hygromycin原核抗性:AmpicillinpLVshRNA-EGFP(2A) Hygro载体是基于HIV1的慢病毒RNA干扰载体,用于表达人工设计合成的shRNA,干扰目标基因的表达。RNA干扰序列插入到载体中BamHI和EcoRI之间,由III类...
载体特性:类型:慢病毒基因过表达载体基因启动子:CMV IE promoter自我剪切肽:T2A真核细胞筛选抗性:Puromycin原核抗性:AmpicillinpLV-T2A-puro载体是基于HIV1的慢病毒基因过表达载体。该载体的克隆位点位于CMV启动子下游,插入的目的蛋白和Puromycin抗性基因通过2A肽链连接成为一个ORF,在CMV启动子驱动下mRNA翻译成一个...
货号:CR3101载体类型:慢病毒表达载体真核细胞筛选抗性:Puromycin原核抗性:Ampicillin 基因启动子:TRE promoter过表达基因:spCas9(HF1)蛋白使用说明:1、该载体在TRE启动子控制下表达spCas9-HF1蛋白。spCas9-HF1蛋白为spCas9的突变体,与野生型spCas9蛋白相比,spCas9-HF1蛋白能显著减少非特异...
品名:HEK293V-mTomato 细胞 货号:CG017 包装:1×10^6~1×10^7 1 支 细胞株类型:稳定表达mTomato荧光蛋白多克隆细胞株 细胞来源:HEK293V 细胞(人胚肾细胞) 表达基因:mTomato抗性:puromycin(建议使用浓度1-2ug/ml)培养基:DMEM(gibco 货号:12100-061)高糖培养基+10%FBS消化液:0...
lncRNA以RNA形式产生生物学功能。人工表达lncRNA对精度的要求很高。研究表明,两侧额外的RNA序列对lncRNA的功能有较大干扰,可能会导致表达出的lncRNA失活。我们根据lncRNA的特点,专门研发了lncRNA的表达载体,载体中有专门的RNA转录起始信号和转录终止信号,能精确生成与内源序列相似的RNA,从而实现lncRNA的正常功能。该...
lncRNA表达稳定细胞株构建服务筛选稳转细胞株最常用的方法是通过慢病毒系统将目的基因转导进入细胞。但是因为表达lnc RNA的特殊要求,慢病毒系统确不适合用于lnc RNA的过表达细胞株构建。慢病毒属于逆转录病毒系统,需要将包括表达框转录为完整的RNA,装入病毒颗粒,进入细胞后再逆转录为DNA,插入细胞的基因组中。因此整个...
Deep learning and CRISPR-Cas13d ortholog discovery for optimized RNA targeting - ScienceDirect需要有效和精确的哺乳动物转录组工程技术来加速生物发现和RNA治疗。尽管可编程CRISPR-Cas13核糖核酸酶有希望,但由于对指导RNA设计规则和脱靶或侧链RNA切割导致的细胞毒性的不完全了解,它们的实用性受到了阻碍。在这里,我...
Precise RNA targeting with CRISPR–Cas13d | Nature BiotechnologyCas13的的侧枝RNA降解的可能性引起了对转录组扰动,影响CRISPR–cas 13的治疗应用。研究表明,侧枝活性只发生在高RfxCas13d表达的情况下。在转录组规模和组合池筛选中使用低拷贝RfxCas13d,我们实现了高靶向敲除,而没有广泛的侧枝活动。此外,对高保真Ca...
Tailoring the evolution of BL21(DE3) uncovers a key role for RNA stability in gene expression toxicity | Communications BiologyGene expression toxicity is an important biological phenomenon and a major bottleneck in biotechnology.Escherichia coliBL21(DE3) is the most popular choice for r...