实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体，转染293T细胞，构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...

一、试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂。 2.转染辅助试剂Polybrene（用水配制为6mg/ml，-20℃冻存）。 3.Cas9表达慢病毒。 4.嘌呤霉素或者G418。 二、实验步骤 1、转染前24小时将293T以适当密度铺板到12孔板。感染病毒时细胞密度在80%左右。 2、取出...

pCas9/gRNA1 货号：CR1001 pCas9/gRNA1载体用于动物细胞基因敲除。该载体用CRISPR系统进行基因敲除，通过在同一个质粒中表达Cas9蛋白和gRNA，实现单独转染一个质粒即可产生基因敲除效果。敲除效率可以与TALEN系统相当，而基因敲除质粒的构建则相对简便很多。...

pCas9/gRNA3载体用于动物细胞基因敲除。该载体表达的Cas9Nickase蛋白是野生Cas9蛋白的D10A突变体。...

pLV-Cas9-Puro 货号： CR2001 载体类型： Cas9 蛋白慢病毒表达载体 原始载体： pLV-Puro 原核抗性：氨苄青霉素 真核抗性：嘌呤霉素 过表达基因： Cas9 蛋白 克隆酶切位点： EcoRI ， BamHI 插入基因大小： 4164bp 使用说明： 1、 用于构建稳定表达 Cas9 蛋白...

style type=text/css !-- .STYLE1 { color: #FF0000; font-weight: bold; } .STYLE2 {color: #FF0000} -- /style pstrong货号：/strongstrongC1203/strongbr strong培养基：/strongDMEM高糖培养基+10%胎牛血清 br strong消化液：/strong0.25%胰蛋白酶，0.53m...

货号：C1204 培养基：DMEM 高糖培养基+10%胎牛血清 消化液：0.25%胰蛋白酶，0.53mMEDTA 冻存液：50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO 培养条件：37℃，5%CO 2 细胞简介： 293T‐Cas9Nick 细胞是用 HEK293T 细胞构建的稳定表达 Cas9 蛋白的细胞株。在转入 gRNA 表...

一、试剂准备 1、Cas9过表达慢病毒载体选择。 货号 名称 CR2001 pLV-Cas9-Puro CR2002 pLV-Cas9-Neo CR2003 pLV-Cas9Nick-Puro CR2004 pLV-Cas9Nick-Neo 我们现提供4种表达Cas9 蛋白的慢病毒载体，您可以根据抗生素要求和基因敲除实验设计进行选择。 1）抗生...

使用时pEGFP/puro与pCas9/gRNA1载体或者pCas9/gRNA3载体共转染，用荧光标签或者嘌呤霉素对转染后的细胞进行初步筛选，可以显著提高基因敲除成功细胞的阳性率，减少后续细胞克隆检测数量。这个步骤对于转染效率较低的细胞尤其有效。...

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CRISPR/Cas9基因编辑技术可以在各种生物中实现基因组编辑。我们采用大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒（CR3010），实现了敲除BL21菌种中的lacZ（β-半乳糖苷酶）基因，敲除效率高达90%。...

CRISPR/Cas9/gRNA（CRISPR-Cas RNA-gudide nuclease）基因敲除技术是继TALEN基因敲除技术之后又一大突破。与TALEN和ZNF技术相比，CRISPR/Cas9系统的载体构建和使用更加方便。基因敲除的特异性由gRNA而不是蛋白来确定，因此避免了复杂的质粒组装构建过程，甚...

货号： C1207 培养基： MEM +10%胎牛血清 消化液： 0.25%胰蛋白酶，0.53mM EDTA 冻存液： 50%胎牛血清，40%DMEM，10%DMSO 培养条件： 37℃，5% CO2 细胞简介： MCF7-spCas9细胞采用用慢病毒载体pLV-Cas9-puro构建。该细胞稳定表达野生型spCas9蛋白(C端有NLS...

产品说明： Cas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。Cas9-NLS蛋白高度纯化，可以用于体外切割，也可用于细胞基因编辑。Cas9-NLS可以在体外与gRNA稳定结合，将Cas9/gRNA复合物通过电转或者转染...

服务编号：W3203 CRISPR/Cas9载体构建服务包括基因编辑实验方案设计、靶点筛选验证、基因编辑载体构建及配套重组载体构建。该服务可以为您提供可用于转染的质粒以便您直接开展基因编辑实验。您也可以根据需要选择其中的部分服务。 CRIPSR/Cas9载体构建服务采...