Cas9通常被引入细胞系以实现CRISPR–Cas9介导的基因组编辑。作者研究了Cas9表达对细胞的基因组和转录活动遗传和转录活动产生的影响。165对人类癌细胞系及其Cas9表达衍生物的基因表达谱显示，Cas9导入后p53途径的上调，特别是在野生型TP53（TP53-WT）细胞系中。这在mRNA和蛋白质水平上得到了证实。此外，在表达Cas9的细胞系中...

为了改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统的降低脱靶效应常常需要牺牲其强大的靶上编辑效率。为了同时提高准确性和效率，作者研发了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白。实验显示将两种嵌合蛋白的预组装的核糖核蛋白复合物转染到人或植物细胞中可将靶向基因编辑效率提高600%，而脱靶效应没有显著增加。两...

一、试剂准备1、Cas9过表达慢病毒载体选择。货号名称CR2001pLV-Cas9-PuroCR2002pLV-Cas9-NeoCR2003pLV-Cas9Nick-PuroCR2004pLV-Cas9Nick-Neo我们现提供4种表达Cas9 蛋白的慢病毒载体，您可以根据抗生素要求和基因敲除实验设计进行选择。 1）抗生素选择：Puromycin或G418 用嘌呤霉素筛选比较快，仅需4-7天即筛选...

摘要改善CRISPR-Cas9基因组编辑系统以降低脱靶效应的努力主要是以牺牲其强大的靶上效率为代价的。为了提高准确性和效率，我们创建了与5’至3’核酸外切酶重组J (RecJ)或GFP融合的嵌合SpyCas9蛋白，并证明了将两种嵌合蛋白的预组装核糖核蛋白转染到人或植物细胞中导致更高的靶向诱变效率，高达600%，而脱靶效应没有显著增加。...

一项微观上的发现不仅能让科学家们了解我们周围的微生物世界，还能提供一种控制CRISPR-Cas生物技术的新方法。在一项新的研究中，新西兰奥塔哥大学的Peter Fineran教授和丹麦哥本哈根大学的R一项微观上的发现不仅能让科学家们了解我们周围的微生物世界，还能提供一种控制CRISPR-Cas生物技术的新方法。在一项新的研究中，新西...

在细菌宿主中包涵体的形成对生物活性蛋白质的大规模回收提出了重大挑战。从包涵体中获得生物活性蛋白的过程是劳动密集型的，并且重组蛋白的产量通常很低。在这里，我们回顾了该领域的发展，旨在通过优化过程的各个步骤，特别是包涵体的溶解和溶解蛋白的重折叠，提高重组蛋白的产量和质量。已经讨论了温和的溶解方法，其基于...

T细胞用于过继细胞治疗(ACT)以靶向和杀死癌细胞。在ACT中，嵌合抗原受体(CAR) T细胞在血癌中显示出临床疗效，但在实体瘤中效果不佳。这种疗效差异的部分原因是肿瘤促进了T细胞的衰竭，在这种情况下，细胞在主动杀死癌症方面的效果较差。科学家们表明，他们可以精确地中断分化过程的流动，从而提高抗肿瘤功效。“T细胞是肿瘤...

CRISPR-Cas系统为基础研究和临床转化应用中正展现出强大的实力和无穷的潜力，其中应用最为广泛的SpCas9系统能与sgRNA形成复合物切割靶位点引入DNA双链断裂（DSBs），之后由非同源重组修复（NHEJ）途径诱导插入缺失突变，或在DNA修复模板的存在下通过同源重组修复（HDR）途径实现精准基因编辑。此外，以CRISPR-Cas9为基础的各...

CIRSPR/Cas9是一种在单条guide RNA（gRNA）的指导下利用Cas9核酸酶对靶标DNA进行特异性识别和切割的技术。该过程涉及到Cas9/gRNA与双链DNA（dsDNA）非特异性的结合、在dsDNA上搜索并识别PAM位点、通过与PAM上游的同源匹配形成RNA/DNA异源双链从而实现在dsDNA上靶点区域的特异性结合和切割。由于Cas9可以高效快捷地靶向并切割...

spCas9-NLS蛋白6折优惠啦！！！产品说明spCas9-NLS蛋白是大肠杆菌重组表达的来自Streptococcus pyogenes的野生型Cas9蛋白。蛋白C端添加了NLS信号肽。spCas9-NLS蛋白高度纯化，可以用于体外切割，也可用于细胞基因编辑。spCas9-NLS可以在体外与gRNA稳定结合，将Cas9/gRNA复合物通过电转或者转染试剂转染进入细胞即可直接对细...

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pCas/pTargetF是目前用于大肠杆菌基因组编辑最受欢迎的系统之一，根据Addgene、MolecularCloud以及实验室自行寄出的数据显示，pCas已被使用723次，pTargetF已被使用615次，但有研究者反映pCas/pTargetF在某些大肠杆菌菌株如BL21(DE3)中编辑不理想，体现为无法获得转化子。2021年3月25日，中科院杨晟实验室在Acta Biochimica...

最近发表在《 基因 组生物学》上的研究发现了几个新的CRISPR-Cas12a位点，这是一种用于编辑哺乳动物 基因组 的CRISPR-Cas系统。本文的两位作者，李伟和滕飞，向我们介绍了他们的研究，以及如何增强和扩展基因组编辑工具箱。 在短短几年内，一项被称为CRISPR...

仅需体外合成sgRNA+PCR切割模板，无需载体构建和测序就能实现对靶点进行检测。即使零经验的师弟师妹们也能在2-3天内完成从实验材料准备到得到靶点切割结果。 spCas9体外酶切试剂盒：快速进行靶点筛选 酶切仅需30min 高效检测靶点 快速展开实验 显著提高基因...

哺乳动物细胞Cas9基因编辑服务采用质粒转染法转入Cas9蛋白/sgRNA表达质粒和重组修复模板，通过抗性基因筛选出阳性细胞。我们有着丰富的细胞株构建经验，可为您提供基因编辑多克隆株、单克隆株筛选服务。 现在可提供的服务项目包括实验方案设计、基因敲除载体...