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品名:HEK293V-tet可诱导EGFP细胞株
货号:CG018
包装:1×10^6~1×10^7 1 支
细胞来源:HEK293V 细胞(人胚肾细胞)
表达基因:EGFP
培养基:DMEM(gibco 货号:12100-061)高糖培养基+10%FBS puromycin 2ug/ml Blasticidin 4ug/ml
消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA
冻存液:50%胎牛血清,40%DMEM,10%DMSO
培养条件:37℃,5% CO2
产品简介:
Tet-On系统是一种用于哺乳动物细胞的可诱导基因表达系统。HEK293V-tet可诱导EGFP细胞株表达Tet-On转激活蛋白,并且包含一个位于TRE启动子控制下的EGFP基因。该细胞可在多西环素(Dox)存在时高水平表达EGFP荧光蛋白,培养时需要puromycin和Blasticidin抗生素维持,可作为Tet-On诱导实验中的对照细胞株使用。
细胞株构建方法:
慢病毒载体pLV-TetON-Bsd(货号EL6001)与慢病毒载体pLV-TRE-EGFP-puro(货号EL6003)包装慢病毒后感染HEK293V细胞,用puromycin和Blasticidin共同筛选得到的可诱导表达EGFP多克隆细胞株。
DOX刺激:
1、将HEK293V-tet可诱导EGFP细胞株接种到24孔板,接种密度60%。
2、按照终浓度0,100ng/ml加入DOX诱导EGFP蛋白表达,24h后检查荧光情况。
细胞图片:
DOX--
DOX 100ng/ml