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可诱导稳定细胞株筛选服务
表1 慢病毒可诱导系统和转座子可诱导系统的比较
慢病毒可诱导系统 | 转座子可诱导系统 | |
目的基因大小 | 通常<3kb | 可达4-8kb |
转染效率 | 高 | 一般,与普通质粒转染类似 |
稳定整合效率 | 高 | 一般 |
IncRNA诱导表达 | 不适合 | 适合 |
可诱导RNA干扰 | 适合 | 适合 |
服务特点
1、提供基因过表达、lnc RNA表达、miRNA表达、lnc RNA抑制、RNAi等全面的细胞诱导表达服务。
2、本底低,诱导效果显著,实验效果优异。
3、采用转座子系统,无需病毒包装,实验周期短。
4、可根据实验目的、细胞特点灵活选择合适的诱导体统。
转座子系统使用的载体
您需提供的资料
1、待构建野生细胞株及细胞株培养资料。
2、目的基因信息或者相关载体。
3、目的基因功能相关参考文献及其他您认为有参考价值的资料。
我们提交的内容
1、实验报告内容:
A 载体构建报告及测序结果。
B 细胞筛选实验报告。
C 基因表达检测结果。
2、产品内容:
A 已构建载体;
B 构建完成的细胞株产品。
可诱导细胞株构建案例
一、使用转座子系统构建luciferase诱导表达细胞株
pSB-TetON-Luci载体表达TetOn调节蛋白,和TetON启动子控制的luciferase基因。该载体可以用单一载体实现诱导表达功能。配套载体pORF-TP提供转座子整合所需的转座子酶,实现细胞稳转功能。
实验内容:
pSB-TetON-Luci及配套载体pORF-SB转染Hela细胞。转染后puromycin筛选2周。将细胞铺板进行诱导实验。诱导24小时后,收集细胞检测luciferase活性。
二、使用慢病毒系统构建EGFP诱导表达细胞株
本实验采用pLV-TetON-Bsd表达TetON调节蛋白,采用pLV-TRE-EGFP-puro表达受Tet调控的EGFP蛋白。
实验内容:
1、将pLV-TetON-Bsd和pLV-TRE-EGFP-puro分别包装为慢病毒。
2、pLV-TetON-Bsd慢病毒转染293V细胞,用Blasticidin筛选稳定细胞株293-TetON。
3、pLV-TRE-EGFP-puro慢病毒转染293-TetON细胞,用puromycin筛选稳定细胞株293-TetON-EGFP(货号:CG018)。
细胞图片:
DOX--
DOX 100ng/ml
常见问题和资料
相关产品:
货号:CG018 HEK293V-tet可诱导EGFP细胞株