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实验原理 TP53是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现TP53基因突变及功能丧失。我们将针对TP53基因设计的靶点构建到pCas9/gRNA1载体,转染293T细胞,构建了TP53基因敲除293T细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1载体表达gRNA和Cas9蛋白。将靶点序列...
在细菌宿主中包涵体的形成对生物活性蛋白质的大规模回收提出了重大挑战。从包涵体中获得生物活性蛋白的过程是劳动密集型的,并且重组蛋白的产量通常很低。在这里,我们回顾了该领域的发展,旨在通过优化过程的各个步骤,特别是包涵体的溶解和溶解蛋白的重折叠,提高重组蛋白的产量和质量。已经讨论了温和的溶解方法,其基于...
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